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Articles taggués ‘TAP’

La méthode TAP (ou TAP-TAG) correspond à Tandem Affinity Purification. C’est une méthode de purification par immunoprécipitation de complexes protéiques basée sur l’utilisation de protéines chimériques portant une étiquette composée de deux domaines d’affinité (les tags historiques sont la Calmodulin Binding Protein CBP et la protéine A).

En principe, il s’agit de deux chromatographies d’affinité à la suite (sur colonnes d’affinité d’IgG pour la protéine A et de Calmoduline pour la CBP) entre lesquelles le premier tag est clivé (par exemple, la protéine A peut être supprimée par clivage d’un site TEV grâce à une protéase). Le décrochage de la dernière colonne se fait par simple compétition.

C’est une méthode très utile en purification ou analyse d’interactions entre biomolécules, évoquées dans les pages suivantes:

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